A prova começou na noite do dia (25), e era de resistência. Eles teriam que ficar em cima de uma base com a sua dupla e não poderiam cair, se não seriam eliminados da prova. A prova durou a noite toda. Os primeiros brothers a serem eliminados foram Caio e Rodolfo. Apareceu no telão para o Rodolfo pegar o produto e ele não encontrou, Rodolfo e Caio foram eliminados da prova. Os demais continuaram na disputa.
Depois, a segunda dupla eliminada foi a Camilla e a Carla, pelo mesmo motivo da primeira dupla: Carla não encontrou o produto no tempo determinado, e ambas foram eliminadas.
Passadas mais de três horas de prova, a terceira dupla eliminada foi Karol Conká e Acrebiano. O brother que usava colete branco, desceu da base em que estavam, sendo que não era a vez dele e sim da Karol Conká, que usava o colete vermelho. Por esse motiva, a dupla foi a terceira a sair da prova.
As últimas quatro duplas
Após 3h 41min de prova, a quarta dupla foi eliminada (João e Thaís). Eles ficaram um tempo bom na prova, mas a Goiana demorou muito para encontrar o produto que estava no telão, e não deu tempo dela voltar para a base.
Se passaram mais de sete horas de prova, até que Pocah e Kerline foram eliminada, a modelo também não encontrou o produto indicado no telão no tempo determinado.
Restou somente duas duplas, que foram: Nego Di e Lucas e Gilberto e Sarah. Até que, com quase nove horas de disputa, Sarah errou o produto indicado, assim, ela e Gilberto foram eliminados. Eles choraram bastante, pois queriam muito aquela imunidade. Logo, Nego Di e Lucas perceberam que haviam sobrado só os dois na prova, se abraçaram e comemoraram bastante por ter vencido a primeira prova de resistência do BBB21, e os demais participantes aplaudiram.